食品微生物普通光學顯微鏡實訓

1. 實驗器材

普通光學顯微鏡、擦鏡紙、標本片（細菌、放線菌、酵母菌、霉菌等）。

2. 實驗試劑

二甲苯、香柏油。

3. 普通光學顯微鏡的使用方法

（1）觀察前的準備

顯微鏡使用時要從鏡箱中取用。取放時注意右手握持鏡臂，左手托住鏡座，使顯微鏡保持直立、平穩。切不可用一只手傾斜提攜、防止摔落目鏡、要輕取輕放，放置時注意鏡臂朝向自己，距上方桌邊沿5～10cm，鏡檢時姿勢要端正。

（2）開啟光源

打開電源開關，通過開關按鈕調節光線強弱。

（3）放置載玻片標本

將待鏡檢的載玻片標本放置在載物臺上，用玻片夾固定，移動標本正對通光孔中央。

（4）低倍鏡觀察

先轉動粗準焦螺旋，用眼從側面觀望，使載物臺快速上升，直到低倍物鏡距標本0.5cm左右停止。接著用眼睛接近目鏡觀察，用手慢慢轉動粗準焦螺旋，使載物臺緩慢下降，直到視野內物像較清晰為止。然后改用細準焦螺旋，調節至物像清晰。最后前后左右輕移載玻片位置，在視野中找到要觀察的部位。注意視野中的物像為倒像，移動載玻片時應向相反方向移動。

（5）高倍鏡觀察

先在低倍鏡下把需進一步觀察的部位調到中心，同時把物象調節到最清晰的程度，才能進行高倍鏡的觀察。旋轉物鏡轉換器，使高倍物鏡移到卡槽位置上，利用物鏡鏡頭的等焦性微調細準焦螺旋，使物像清晰。再次移動載玻片標本找到欲觀察的部位。

（6）油鏡觀察

油鏡的工作距離很小，所以要防止載玻片和物鏡上的透鏡損壞。使用時，一般是經低倍、高倍到油鏡。當高倍物鏡對準標本后，再加油鏡觀察。載玻片標本也可以不經過低倍和高倍物鏡，直接用油鏡觀察。顯微鏡有自動止降裝置的，載玻片上加油以后，將油鏡下移到油滴中，到停止下降為止，然后用微調向上調準焦點。沒有自動止降裝置的，對準焦點的方法是從顯微鏡的側面觀察，將油鏡下移到與載玻片稍微接觸為止，然后用微調向上提升調準焦點。調節至找到清晰圖像，并繪制視野圖像，標注樣品名稱和放大倍數。

（7）整理

顯微鏡使用結束后、下降載物臺至最低處，取下載玻片標本，清潔顯微鏡。油鏡鏡頭清潔要用三張擦鏡紙。第一張擦鏡紙拭去鏡頭上的香柏油，第二張擦鏡紙蘸少許二甲苯擦拭鏡頭上殘留的油跡，第三張擦鏡紙擦去殘留的二甲苯。另外，可用柔軟的綢布擦拭顯微鏡的金屬部件。把物鏡轉動呈“八”字形或置于最低倍物鏡下，并調節玻片夾至適當位置，使物鏡不會碰到。最后，套上專用防塵罩，并將顯微鏡放回指定位置。

4. 顯微鏡使用注意事項

（1）必須遵守操作規程，嚴格認真地按要求操作。取送顯微鏡時，應右手握住鏡臂，左手拖住鏡座，輕拿輕放。切勿用一只手斜提，前后擺動，防止目鏡畫出跌落。

（2）保護好鏡頭，揩拭目鏡、物鏡上的灰塵或污物，必須使用專用的擦鏡紙。切勿用手指、手帕、紗布和普通紙擦。

（3）物鏡鏡頭的切換一定要使用轉換器，以免使鏡頭脫落和損壞。

（4）轉動粗、細準焦螺旋時，不要用力過猛，以防止機件損傷，調節失靈。

（5）鏡檢時，坐姿端正，一般用左眼觀察物象，用右眼看實驗報告紙畫圖。兩眼須同時睜開，以減少疲勞。

（6）載物臺要保持清潔干燥，切勿上材料、水滴、試劑接觸物鏡和載物臺。如沾上，應立即揩擦干凈，避免鏡頭等被污染和腐蝕。

5. 顯微鏡的維護

顯微鏡是精密貴重的儀器，必須很好地維護。顯微鏡用完后要放回原來的鏡箱或鏡柜中，同時要注意下列事項：

（1）觀察完后，先降下載物臺，移去觀察的載玻片標本。

（2）用過油鏡的，應先用擦鏡紙將鏡頭上的油擦去，再用擦鏡紙蘸著二甲苯擦拭2～3次，最后再用擦鏡紙將二甲苯拭去。

（3）轉動物鏡轉換器，使鏡頭離開通光孔。

（4）將鏡身下降到最低位置，調節好鏡臺上標本移動器的位置，罩上防塵套。

（5）鏡頭的保護最為重要。不要隨意取下目鏡，以防止塵土落入物鏡。鏡頭要保持清潔，只能用軟而沒有短絨毛的擦鏡紙擦拭。擦鏡紙要放在紙盒中，以防沾染灰塵。切勿用手絹或紗布等擦拭鏡頭。物鏡在必要時可以用溶劑清洗，但要注意防止溶解固定透鏡的膠固劑。根據不同的膠固劑，可選用不同的溶劑，如酒精、丙酮和二甲苯等，其中最安全的是二甲苯。方法是用脫脂棉花團蘸取少量的二甲苯，輕擦，并立即用擦鏡紙將二甲苯擦去，然后用洗耳球吹去可能殘留的短絨。目鏡是否清潔可以在顯微鏡下檢視。轉動目鏡，如果視野中可以看到污點隨著轉動，則說明目鏡已沾有污物，可用擦鏡紙擦拭接目的透鏡。如果還不能除去，再擦拭下面的透鏡，擦過后用洗耳球將短絨吹去。在擦拭目鏡或由于其他原因需要取下目鏡時，都要用擦鏡紙將鏡筒的口蓋好，以防灰塵進入鏡筒內。